CRISPR-Cas系統是一種原核適應性免疫系統，用來抵御外來遺傳組分對生命體的干擾。1類CRISPR系統（包括I、III和IV型）包含多蛋白效應復合物，而2類CRISPR系統（包括II、V和VI型）具有單一效應蛋白。CRISPR-Cas9屬于2類II型CRISPR系統，是目前使用最廣泛的基因組編輯工具，由Cas9核酸酶、負責DNA靶向的crRNA及反式激活tracrRNA組成。
CRISPR-Cas12a是另一種用于基因編輯的2類RNA引導的核酸內切酶。Cas12a核酸酶識別5’-TTTV PAM相反鏈上與crRNA間隔區互補的DNA靶序列，無需使用tracrRNA。識別后于RuvC域和Nuc域處產生交錯的DNA雙鏈斷裂。與Cas9產生平末端相比，Cas12a產生交錯末端可能更有利于以精確方向整合DNA序列等應用。CRISPR-Cas12a基因編輯系統可作為Cas9系統的極大補充，甚至在某些編輯領域中比Cas9系統更具優勢。
泓迅科技依托完備的Syno?合成平臺及豐富的專業知識和實踐經驗積累，可提供基于CRISPR-Cas12a系統的一站式解決方案，包括Cas12a(Cpf1) 核酸酶產品及定制化crRNA序列合成服務。經體外系統活性驗證，我們的Cas12a核酸酶產品及化學合成的crRNA序列可很好的發揮基因序列的切割作用。
CRISPR-Cas12a編輯系統的優勢：
a. CRISPR-Cas12a系統拓展了CRISPR-Cas9系統不可用的編輯位點，且能在序列5’端產生交錯切割。這相比CRISPR-Cas9系統，顯著增加了細胞選用同源重組修復（HR）方式的概率，提升了基因編輯效率。
b. Cas12a識別富含胸苷的PAM 序列 (YTN)，能夠在具有豐富AT基因組的生物體中進行基因組編輯，比CRISPR-Cas9系統更具廣泛的序列編輯范圍。
c. 只需要crRNA與Cas12a蛋白的簡單復合而不需要tracrRNA，且CRISPR-Cas12a的crRNA較短，一般在40-44nt左右，更有利于化學合成。
CRISPR-Cas12a crRNA
目前，將As Cas12a(Cpf1)與crRNA形成的核糖核蛋白（RNP）直接轉移到細胞中的方法具有更安全、更快、脫靶效應更低、編輯效率更高等優點。已逐漸成為使用 CRISPR基因編輯技術的一種更有效的方式。
CRISPR-Cas12a crRNA 是一個單一的 40-44nt左右的引導 RNA，包含一個 20nt的恒定區和一個 20-24nt的特異性結合區域。我們通常建議使用 21nt的特異性結合區域以獲得最佳活性。crRNA識別 TTTV PAM 位點相反鏈上的21-24 個核苷酸，其中 V 是 A、C 或 G。在進行crRNA序列設計時，設計的crRNA序列中不包含PAM 序列。
服務詳情
| 長度（nt） | 訂購規格 | 修飾類型 | 純化方式 | 周期（工作日） | 發貨形式 |
|---|---|---|---|---|---|
| 40-44nt | 1-10 OD | 硫代 2′-OMe Blocking |
HPLC | 7-10 |
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As Cas12a(Cpf1)核酸酶
As Cas12a(Cpf1)核酸酶，來源于Acidaminococcus sp. BV3L6 (A.s.)，由大腸桿菌系統進行表達。C末端帶有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS兩個核定位信號。同時重組蛋白C末端還帶有TEV蛋白酶切位點以及6xHis標簽。為獲得最佳編輯效果，我們推薦將As Cas12a(Cpf1)核酸酶與Cas12a crRNA 以等摩爾量結合。
產品屬性
| 產品名稱 | As Cas12a(Cpf1)核酸酶 |
|---|---|
| 分子量 | 157.65KDa |
| 表達系統 | Escherichia coli |
| 標簽 | C-6xHis |
| 純度 | SDS-PAGE，≥95% |
| 濃度 | 1mg/mL, 100ug蛋白約633 pmol |
| 內毒素 | LAL, <0.1EU/ug |
| 儲存緩沖液 | 10 mM Tris, pH8.0, 300 mM NaCl, 0.5 mM TCEP, 50% glycerol |
| 儲存條件 | -20℃、-80℃保存 |
| 發貨規格 | 貨號HX-AsCas12a-1: 100ug 貨號HX-AsCas12a-2: 0.5mg 貨號HX-AsCas12a-3: 1mg |
| 運輸條件 | 藍冰運輸 |
*注意事項：短期存儲可在-20℃保存，長期存儲可分裝并在-80℃保存，切記反復凍融，保質期1年。
產品質檢圖
Lane2: As Cas12a(Cpf1)核酸酶, ~157.65KDa
Cas12a核酸酶活性驗證：
結果分析：目標DNA序列1kb，在Cas12a核酸酶及crRNA作用下切割目標DNA序列，可產生700bp及300bp的小片段。如圖所示，在加入3ul及1.5ul Cas12a核酸酶時，都可以表現出高效的DNA序列切割效率。
免費申請活動詳情
- 活動時間：2022.09.01-2022.10.31
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